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牛血清白蛋白的作用,不同等级的牛血清白蛋白的应用

2020-09-23 来源:转载自第三方

一、什么是牛血清白蛋白

      牛血清白蛋白(BSA),CAS号9048-46-8是牛血清中的一种球蛋白,包含607个氨基酸残基,分子量为66.446KDa,等电点为4.7。牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用。

二、牛血清白蛋白的作用

      牛血清白蛋白(BSA)一般做为稳定剂被用于限制酶或者修饰酶的保存溶液和反应液中,因为有些酶在低浓度下不稳定或活性低。加入BSA后,它可能起到“保护”或“载体”作用,不少酶类添加 BSA后能使其活性大幅度提高。不需要加BSA的酶加入BSA一般不会受到什么影响。对多数底物DNA而言,BSA可以使酶切更完全,并可实现重复切割。在37℃,酶切反应超过1h时,BSA可以使酶更加稳定,因为在不含BSA的反应缓冲液中,许多限制性内切酶在37℃下只能存活10"20min甚至更短的时间。而BSA可以结合缓冲液或底物DNA中抑制限制性内切酶活性的金属离子和其它化学物质。

三、牛血清白蛋白的分级及选择(牛血清白蛋白等级低到高)

      1.牛血清白蛋白(等级最低的BSA),这个是普通意义上的BSA,只要主要成分是BSA的产品都可以成为牛血清白蛋白,所以他也涵盖了其他等级的BSA,所以客户要注意其纯度(一般是工业生产用)。

      2.牛血清白蛋白第五组分,这个是生物技术级的产品,适用范围是最广的,有些厂家的BSAV脂肪酸和内毒素很低,可直接用于细胞培养,纯度高甚至可以用于任何相关实验(Elisa实验,WB实验)。

      3.牛血清白蛋白(无必须脂肪酸),脂肪酸含量极低,脂肪酸含量≤0.002% (w/w),或在1% BSA溶液中脂肪酸浓度< 2 µmol/L(可用于测定培养的组织细胞释放的游离脂肪酸浓度等)。

      4.牛血清白蛋白(无蛋白酶),或者称为无Protease 牛血清白蛋白,或者称为Protease Free BSA,产品不含有DNAse酶、蛋白酶以及IgG(用于放射免疫、酶联免疫以及作为稀释剂或者封闭剂等)。

       5.牛血清白蛋白(细胞培养级),纯度98%即可,但是要求脂肪酸含量和内毒素含量极低(细胞培养及细胞培养相关的实验等)。

      6.牛血清白蛋白,高纯度,纯度99%以上(金标级,制作金标抗体等)。

      7.交联牛血清白蛋白:冷冻干燥粉末,含单体(66000)、二聚体(132000)、三聚体(198000)、四聚体(264000)等(测定未知蛋白质的分子量,也可用于生化教学实验,用以摸索电泳条件、检定电泳结果等)。


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