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四川大学开发出基于TMB的快速可视化核酸检测平台

2020-06-09 来源:亚科官网

核酸检测(nucleic acid tests, NATs)在疾病诊断和监测领域具有不可或缺的地位,在此次疫情中更是发挥了不可替代的作用。但开展核酸检测,一般须具备有专业的分子实验室及配套的检测设备。而目前常态化疫情防控形势下,扩大核酸检测范围等措施的开展,需要更便捷、检测时间更短、成本更低、准确率和安全性更高的核酸检测方式。

近日,四川大学李峰课题组与吴鹏课题组合作,报道了一种使用DNA嵌入染料(DNA intercalating dyes, DIDs)进行比色核酸检测和定量的方法,称之为快速光激活底物显色技术(FLASH),然后通过与PCR集成,设计了一种新型可视化核酸快速检测平台:FLASH PCR。

 

研究团队以前的研究表明,染料嵌入DNA后也能产生单线态氧,从而使传统的荧光DIDs转换成type-II型光敏剂。基于此,研究人员开发出了快速光激活底物显色技术(FLASH),该技术可快速光氧化显色底物,产生比色信号读出。

研究人员以SYBR Green I (SG-I) 为光敏剂,以3,3,5,5 -四甲基联苯胺(TMB)为显色底物,将PCR扩增子与这两种化合物直接混合,然后再进行光照完成FLASH反应,将FLASH系统与PCR结合,能够成功将基于DID参与的荧光PCR转化为比色PCR,开发出比色FLASH PCR。

并且研究人员通过制造的两个读出平台便携式电子FLASH阅读器和纸质FLASH条,验证了FLASH PCR在POC诊断中的实际适用性

总之,FLASH PCR具有简易性和灵活性,未来,FLASH技术将实现分散环境下快速、稳健且灵敏的核酸检测,从而为即时诊断以及资源有限地区疾病诊断产生真正实用的帮助。

参考文献:Tianyu Dong, Hayam Mansour, Hao Hu, Guan A. Wang, Colton J. F. Watson, Michael Yousef, Gabriela Matamoros,et al.Colorimetric Polymerase Chain Reaction Enabled by a Fast Light-Activated Substrate Chromogenic Detection Platform.Anal. Chem., 2020, 92, 6456–6461, DOI: 10.1021/acs.analchem.9b05591



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