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CHAPS|CAS:75621-03-3|在蛋白提取领域的应用

2023-02-06 来源:亚科官网

3-[3-(胆酰胺丙基)二甲氨基]丙磺酸内盐(英文简称:CHAPS,CAS:75621-03-3)是分子式为C32H58N2O7S,分子量为614.877的一种有机物。CHAPS 是一种两性离子去污剂,广泛用于蛋白质纯化过程, CHAPS还能在生化研究中用于变性裂解细胞,提取RNA和DNA;另外,CHAPS还可用于缓冲液的配制。CN106478786A专利中公开了一种脱硫杆菌胞内有效蛋白的提取方法,CHAPS在该专利中作为两性表面活性剂。该方案具体步骤如下:
       (1)脱硫杆菌活化培养、液体发酵培养,取发酵液,离心,去除上清液,收集下层沉淀;
       (2)取步骤(1)中下层沉淀,加入1~2mL/g裂解液(裂解液为尿素、两性表面活性剂和还原保护剂的水溶液,其中两性表面活性剂为CHAPS),在0~4℃条件下磁力搅拌,放入-18~-22℃冷冻8~10小时;
       (3)将步骤(2)中的冷冻物质,在0~4℃条件下超声破碎,后再次放入-18~-22℃冷冻8~10小时;
       (4)将步骤(3)中得到的冷冻物质,在0~4℃条件下超声破碎,离心;
       (5)取步骤(4)中离心得到的上清蛋白溶液,加入有机混合溶液,充分混匀震荡后离心;
       (6) 将步骤(5)中的离心后混合物,去除上清液,加入有机溶剂,充分混匀震荡,将混液离心;
       (7)重复操作步骤(6)2~4次,将得到的离心后的混合物,去除上清液,冻干机冷冻干燥,密闭,0~4℃冷藏保存。
       本专利通过发酵液离心分离、细胞破碎、蛋白提取与纯化实现脱硫杆菌胞内有效蛋白的分离纯化,是一种易于操作、成本低、安全可靠的提取方法。

参考文献
CN106478786A 一种脱硫杆菌胞内有效蛋白的提取方法.



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