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AMPPD的碱性磷酸酶(ALP)的发光体系简介

2015-07-27 来源:亚科官网

关键词:碱性磷酸酶;AMPPD;APS 5 ;应用

 
碱性磷酸酶(ALP)分子质量小、稳定性好、活性高、易分离提纯,已广泛用于酶联免疫分析和核酸杂交析。碱性磷酸酶和1,2-二氧环乙烷构成的发光体系是目前最重要、最灵敏的一类化学发光体系。这类体系中具有代表性的是Bronstein等提出的ALP-AMPPD发光体系。在溶液中AMPPD的磷酸酯键很稳定,非酶催化的水解非常慢,在pH12、0.05mol/L碳酸钠缓冲溶液中,分解半衰期可达74年,几乎没有试剂本身的发光背景。AMPPD为磷酸酯酶的直接发光底物,可用来检测碱性磷酸酶或抗体、核酸探针及其他配基的结合物。
ALP-AMP-PD发光体系具有非常高的灵敏度,无论是固相还是液相检测,对标记物ALP的检测限达10mol~21mol,是最灵敏的免疫测定方法之一。对AMPPD加以改进,获得具有更好反应动力学和更高灵敏度的新一代产物CSPD和CDP-Star。这些体系已广泛用于各种基因、病原体DNA的鉴定。
另外,在碱性磷酸酶(ALP)方面,新的发光体系APS 5(也有些写为APS-5)在普及中,APS 5被称为超高灵敏度检测试剂,其灵敏度、发光时间、发光强度等都超越了AMPPD,但其稳定性差,适用温度偏低。目前还有新型的发光试剂PS-3(2005年)性能比APS-5还要高。