MTT溶液的配制

通常MTT配成的终浓度为5mg/ml，须用PBS（磷酸缓冲液）或生理盐水做溶剂。（市面上一般MTT的包装为100mg,250mg或1g）

1.    对于100mg这样的小包装，厂家都是将MTT放入小管中的，建议不要再用天平称量分装，而应该一次性将其全配制成溶液，如100mg用20m1PBS来溶解。具体做法：预先在5 0ml离心管(没有的话，可用培养瓶替代)加入20m1 PBS，从中先吸取500-1000u1 PBS装入含MTT的小管中，吹打若十次后将其移入50ml离心管，然后再混匀。可以重复几次，以使小管中的MTT不残留于管内。将MTT完全混匀后，用0.22 um滤膜过滤以除去溶液里的细菌，分装避光(避光袋或是黑纸、锡箔纸包住)可长期保存于-20度。按细胞培养板每孔需加10u1计算，一般每96孔板约击1m1，所以分装时可考虑每管分装1 ml 。

2.   对于大包装，可按上述方法称取一部分溶解，也有人将粉剂分装在EP管里，用的时候现配，直接往培养板中加。

3.   配制MTT时用PBS溶解，也有人用生理盐水配，60度水浴助溶。PBS配方：NaCl 8g，KCl 0.2g，Na2HPO4 1.44g，KH2PO4 0.24g，调PH 7.4，定容至1L。

注意事项：

（1）：在配制和保存的过程中，容器最好用铝箔纸包住。

（2）：配成的MTT需要无菌，MTT对菌很敏感。

（3）：MTT一般最好现用现配，过滤后4度避光保存两周内有效，或配制成Smg/ml保存在-20度长期保存，避免反复冻融，最好小剂量分装，用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光以免分解。当MTT变为灰绿色时就绝对不能再用。

（4）：MTT有致癌性，用的时候小心，有条件最好带那种透明的簿膜手套。