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常见的生化试剂究竟有多少种?

2019-03-04 来源:亚科官网

随着生命科学的发展,生化试剂已发展成为化学试剂的一大类,有商品10000多种。中国销售的生化试剂品种有2500多种。目前在国内,生化试剂涵盖肝功、肾功、血脂、心肌、胰腺、特殊蛋白等,能够满足终端用户的各种生化检测需求。

生化试剂的概念

生化试剂是从生物体中提取的或由化学合成的生物体的基本成分,用于生物成分的分析鉴定及生物制品的制造。生化试剂主要是针对血常规、尿常规、肝功能、肾功能、胰腺、糖尿等疾病的诊断试剂。生化诊断是最早实现自动化的检测手段,也是目前最常用的体外诊断方法之一。

常见的生化试剂种类

1蛋白酶K

能水解消化蛋白质,特别是与DNA结合的组蛋白。再尿素和SDS中稳定。一般工作浓度是50100μg/ml,推荐反应缓冲液:50mM Tris-HCl (pH7.5)10mM CaCl2

2SDS

十二烷基硫酸钠溶解细胞膜上的脂类与蛋白质,因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜,并解离细胞中的核蛋白,SDS 还能与蛋白质结合而沉淀

3IPTG

异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 常用于蓝白斑筛选及IPTG诱导的细菌内的蛋白表达等. IPTG和乳糖的结构相似,所以它和乳糖一样,可以与乳糖操纵元的阻遏蛋白结合,使阻遏蛋白的空间构像变化,四聚体解聚成单体,失去与操纵子特异性结合的能力,从而解除了阻遏蛋白的作用,使其后的基因得以转录合成利用乳糖的酶类。

与乳糖不同的是,IPTG不被β-半乳糖苷酶水解。常与X-GAL一起用于蓝白斑筛选。作用极强的诱导剂不被细菌代谢而十分稳定

4MOPS

一种缓冲液,有抑制RNA酶的作用,一般和甲醛(用于变形RNA)用于RNA变性电泳。

5盐酸胍

盐酸胍等可使蛋白质结构中的氢键发生断裂,这增加了非极性分子包括氨基酸侧链的溶解度,减少了疏水相互作用。

6吖啶橙

是一种荧光色素,与细胞中DNARNA结合量存在差别,可发出不同颜色的荧光,与DNA结合量少发绿色荧光,与RNA结合量多发桔黄色或桔红色荧光。该染料具有膜通透性,能透过细胞膜,使核DNARNA染色。

在荧光显微镜下观察,吖啶橙可透过正常细胞膜,使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光;而在凋亡细胞中,因染色质固缩或断裂为大小不等的片断,形成凋亡小体。吖啶橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光,或黄绿色碎片颗粒;而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。

吖啶橙AO常与溴化乙啶EB合用双染,因EB只染死细胞使之产生桔黄色荧光,由此可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞它还可以用作移码突变的诱变剂能镶嵌于两个相邻的碱基对之间,这样在DNA复制过程中,会使DNA链增加或缺失一个碱基,造成移码突变。吖啶橙染液有毒,操作时要戴手套,需避光。

7DMSO

二甲基亚砜实验室常用于作液体层析溶剂,同时用作测试物质紫外消光值上时用作参照物能溶于所有烷烃和烯烃。

8TRICINE

N-[三(羟甲基)甲基]甘氨酸, 常见的电泳系统是Tris-甘氨酸系统;TrisTricine电泳则用于分子量小于10kDa的多肽和蛋白的电泳,能够获得较好的分离效果. 可以用前者代替。


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本文由苏州亚科科技股份有限公司编辑