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关于Tris缓冲液的知识你了解多少?

2019-03-04 来源:亚科官网

Tris缓冲液是在生物化学研究中使用较广泛的一种缓冲剂,其本身为弱碱,常用有效pH在“中性”范围,Tris-HCl缓冲液:pH=7.5~8.5;Tris-磷酸盐缓冲液:pH=5.0~9.0。Tris缓冲液在藻类培养基的配置过程中扮演pH稳定剂的角色,来实现藻类培养过程中pH的稳定性,本文将具体介绍一下关于的Tris缓冲液的相关知识。

Tris-HCl缓冲液优点

碱性较强,可以只用这一种缓冲液配置由酸到碱的范围pH缓冲液;

对生物化学过程干扰很小,不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀。

Tris-HCl缓冲液缺点

pH受浓度影响较大,稀释10倍,pH变化大于0.1

温度效应大,如4℃时pH=8.4,37℃时pH=7.4

易吸收空气中的二氧化碳

对某些pH电极有一定干扰作用,要使用与Tris溶液具有兼容性的电极

除了Tris-HCl之外,tris还有多种衍生缓冲液:

TBS=Tris-HCl+ NaCl+KCl,常用于清洗免疫染色的组织或Western Blotting中的蛋白印迹膜等;

TBST=Tris-HCl+NaCl+tween20,做Western Blotting中常用的一种洗膜缓冲液;

TE=Tris-HCl+EDTA,对DNA的碱基有保护性,常被用于DNA的稳定和储存;

TAE=Tris base+乙酸+EDTA,是大片段DNA短时间电泳时广泛使用的缓冲系统;

TBE=Trisbase+硼酸+EDTA,适用于长时间DNA电泳,对较小片段分离效果较好。

各种pH值的Tris缓冲液的配制

所需pH值(25℃)

0.1mol/L HCl的体积

7.1

45.7

7.2

44.7

7.3

43.4

7.4

42.0

7.5

40.3

7.6

38.5

7.7

36.6

7.8

34.5

7.9

32.0

8.0

29.2

8.1

26.2

8.2

22.9

8.3

19.9

8.4

17.2

8.5

14.7

8.6

12.4

8.7

10.3

8.8

8.5

8.9

7.0

某一特定pH值的0.05mol/L Tris缓冲液的配制:将50ml 0.1mol/L Tris碱溶液与上表所示相应体积(单位:ml)的0.1ml/L HCl混合,加水将体积调至100ml

温度对50mmol/L Tris-HCl液pH值的影响

4℃

25℃

37℃

8.1

7.5

7.2

8.2

7.6

7.3

8.3

7.7

7.4

8.4

7.8

7.5

8.5

7.9

7.6

8.6

8.0

7.7

8.7

8.1

7.8

8.8

8.2

7.9

8.9

8.3

8.0

9.0

8.4

8.1

9.1

8.5

8.2

9.2

8.6

8.3

9.3

8.7

8.4

9.4

8.8

8.5

 

相关链接:Tris缓冲液

本文由苏州亚科科技股份有限公司编辑



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