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牛血清白蛋白(BSA)9048-46-8 的用途及提取方法

2020-03-13 来源:亚科官网

牛血清白蛋白(BSA),CAS:9048-46-8,又称第五组分,一种常用的PCR扩增增强剂和稳定剂能够起到稳定扩增酶、降低PCR抑制物的作用,常见于核酸检测试剂中,广泛应用于生物学诸多学科及医、药学各领域。

牛血清白蛋白(BSA)在动物细胞无血清培养中,起到生理和机械保护作用和载体作用。牛血清白蛋白(BSA)在生化实验中有广泛的应用,例如在western blot和制备ELISA板中的封闭试剂。牛血清白蛋白(BSA)生化研究、遗传工程和医药研究,一般作为稳定剂被用于限制酶或者修饰酶的保存溶液和反应液中,也可用作医药保健食品、调味品[1]

牛血清中白蛋白BSA的制备方法很多,包括盐析法、有机溶剂沉淀法和热激法提取等,但目前的制备方法所得的牛血清白蛋白(BSA收率或纯度都比较低,存在脂肪酸、蛋白酶、核酸酶以及内毒素等杂质,限制了牛血清白蛋白(BSA)的进一步应用,因此,一种高纯度从牛血清中分离白蛋白的方法十分关键。

专利CN105017412B公开的制备牛血清白蛋白(BSA)的方法,克服了现有技术的不足,能够从牛血中提取出高纯度、高收率的牛血清白蛋白(BSA),且不含小分子物质以及只含较低浓度的内毒素。包括以下步骤:

首先向牛血清中加入生理盐水或PBS溶液将牛血清稀释;再向稀释后的牛血清中加入适量硫酸铵,2~8℃静置30min以上,离心收集上清液;

第二步,向上清液中加入2~3倍体积的PBS溶液,混匀后进行疏水层析,使用PBS溶液洗脱,收集洗脱液;

第三步,将洗脱液进行分子筛层析,收集不含盐和其它小分子的蛋白峰;所述层析填料为G10-G75葡聚糖;

第四步,使用阴离子交换层析进一步纯化牛血清白蛋白(BSA),通过0.1~1.5M浓度氯化钠进行梯度洗脱,收集精纯的牛血清白蛋白(BSA);

最后,经过对病原微生物进行灭活、分子筛层析、超滤浓缩、过滤除菌得到纯度高于99.5%的牛血清白蛋白(BSA)[2]

这种方法最大程度地去除血浆中的杂质,有效提高了牛血清白蛋白(BSA)的纯度,对于其在生化研究、遗传工程和医药研究的应用具有重要价值。

相关链接:牛血清白蛋白(BSA)

参考文献:

[1]. 苏州亚科股份,氨基酸类产品牛血清蛋白|9048-46-8|简述

[2]. 一种从牛血清中分离高纯度牛血清白蛋白的方法.CN105017412B