HEPES|CAS 7365-45-9|在细胞培养基中的应用

HEPES（4-羟乙基哌嗪乙磺酸，又名N-(2-羟乙基)哌嗪-N'-2-乙烷磺酸）是一种两性离子缓冲剂，属于good's缓冲剂，25℃时pKa 7.45,pH缓冲范围为6.8-8.2,因此广泛应用于细胞培养基、IVD试剂盒、化妆品、医药等领域。CN102827804A专利中，介绍了HEPES在细胞培养基中应用，该培养基主要包含7部分组成，具体为：维生素、脂类、氨基酸、无机盐、蛋白水解物、缓冲成分和添加物，各个组成部分具体信息如下：

       1.维生素由12种成分构成，具体为肌醇，维生素C，磷酸吡哆醇，磷酸吡哆醛，钴铵素，烟酰胺，核黄素，盐酸硫胺素，D-泛酸钙，叶酸，生物素(Biotin)以及氯化胆碱；

2.脂类由2种成分构成，具体为亚油酸和嵌段式聚醚F68(PluronicF-68)；

3.氨基酸由21种成分构成，具体为L-色氨酸，L-半胱氨酸，L-异亮氨酸，L-亮氨酸，L-缬氨酸，L-精氨酸盐酸盐，L-组氨酸盐酸盐，L-赖氨酸，L-蛋氨酸，L-谷氨酸，L-苯丙氨酸，L-天冬酰，甘氨酸，L-脯氨酸，L-丙氨酸，L-天冬氨酸，L-丝氨酸，L-苏氨酸，L-谷氨酰胺，L-胱氨酸盐酸盐以及L-酪氨酸二钠盐；

4.无机盐由11种成分构成，具体为六水氯化镁，无水硫酸镁，无水氯化钙，氯化钾，氯化钠，一水磷酸二氢钠，磷酸氢二钠，七水硫酸锌，九水合硝酸铁，亚硒酸钠以及五水硫酸铜；       

5.蛋白水解物可以为乳蛋白水解物，酵母水解物或者植物水解物；

6.缓冲成分为碳酸氢钠和HEPES；

7.添加物由6种成分构成，具体为D-葡萄糖，丙酮酸钠，还原型谷胱甘肽，次黄嘌呤钠盐，腐胺和硫辛酸。

本专利有以下有益效果：

1.该培养基使用常规方法制备，可支持Vero在方瓶、滚瓶上生长，并可支持Vero细胞微载体悬浮培养和微载体悬浮规模放大培养。另外也可以作为病毒维持液，实现病毒无血清生产。

2.成本低廉，可实现规模化生产。

 参考文献

CN102827804A  适用于Vero细胞微载体悬浮放大培养的培养基及方法.