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叶绿体ATP合酶相关抗体(植物抗体专家PhytoAB)

2023-11-30 来源:亚科官网

本文转自植物科学最前沿
ATP合酶在光合作用过程中通过电子传递链释放的能量,将质子穿过膜至ATP合成。其中ATP合酶包括9种蛋白:AtpA, AtpB, AtpC, AtpD, AtpE, AtpI, AtpF, AtpG, AtpH 。它由两个复合物组成:CF1, CF0。其中,CF1包含α, β, γ, δ, ε五个亚基,分别由atpA, atpB, atpC, atpD, atpE 基因编码;CF0包含IV/a, I/b, II/b’, III/c 四个亚基,分别由atpI, atpF, atpG, atpH 基因编码。
在高等植物叶绿体中,atp基因定位于质体基因组和核基因组,并且被分为两个不同的clusters,分别是:the large atp operons 和 the small atp operons。
一、针对AtpA, AtpB, AtpC蛋白研究,我们研发了以下植物抗体:

注:Western Blot结果如上。PHY0010为AtpA抗体,免疫原为拟南芥AtpA (ATCG00120)靠近C端的多肽序列。上样蛋白:拟南芥类囊体膜蛋白;1-3泳道上样量分别是0.1 μg, 0.25 μg, 0.5 μg,用15% SDS-Urea-PAGE电泳。
PHY0311为AtpA抗体,免疫原为拟南芥AtpA (ATCG00120)全长的重组蛋白。上样蛋白,上样量以及PAGE胶与PHY0010相同。

注:Western Blot结果如上。PHY0011A为AtpB抗体,免疫原为拟南芥AtpB (ATCG00480)靠近N端的多肽序列。上样蛋白:拟南芥类囊体膜蛋白;1-3泳道上样量分别是0.25μg, 0.5μg, 0.75μg,用15% SDS-Urea-PAGE电泳。
PHY0312为AtpB抗体,免疫原为拟南芥AtpB (ATCG00480)全长的重组蛋白。上样蛋白:拟南芥类囊体膜蛋白;1-3泳道上样量分别是0.1μg, 0.25μg, 0.5μg;用15% SDS-Urea-PAGE电泳。

注:Western Blot结果如上。PHY0161为AtpC抗体,免疫原为拟南芥AtpC1 (AT4G04640)靠近N端的14个氨基酸多肽,此序列与AtpC2 (AT1G15700)同源性为93%。上样蛋白:1-3泳道为野生型拟南芥类囊体膜蛋白,4泳道为拟南芥突变体的类囊体膜蛋白;1-3泳道上样量分别是0.1μg, 0.25μg, 0.5μg,4泳道上样量为0.5ug,用15% SDS-Urea-PAGE电泳。
PHY0359为AtpC2抗体,免疫原为拟南芥AtpC2 (AT1G15700)靠近C端的多肽序列。上样蛋白:拟南芥类囊体膜蛋白;1-3泳道上样量分别是0.1μg, 0.25μg, 0.5μg;用15% SDS-Urea-PAGE电泳。
二、针对 AtpD, AtpE, AtpG, AtpF, AtpH, AtpI蛋白研究,我们研发了以下的植物抗体:

注:Western Blot结果如上。PHY0314为AtpD抗体,免疫原为拟南芥AtpD (AT4G09650)全长的重组蛋白。上样蛋白:拟南芥类囊体膜蛋白;1-3泳道上样量分别是0.1μg, 0.25μg, 0.5μg,用15% SDS-Urea-PAGE电泳。
PHY0315为AtpE抗体,免疫原为免疫原为拟南芥AtpE (ATCG00470)全长的重组蛋白。上样蛋白:拟南芥类囊体膜蛋白;1-3泳道上样量分别是0.5μg, 1.25μg, 2μg;用15% SDS-Urea-PAGE电泳。
PHY0170S为AtpG抗体,免疫原为拟南芥AtpG (AT4G32260)靠近N端的多肽序列。上样蛋白:1-3泳道为野生型拟南芥类囊体膜蛋白,4泳道为拟南芥突变体的类囊体膜蛋白;1-3泳道上样量分别是0.1μg, 0.25μg, 0.5μg,4泳道上样量为0.5ug;用15% SDS-Urea-PAGE电泳。

注:Western Blot结果如上。PHY0316为AtpF抗体,免疫原为拟南芥AtpF (ATCG00130)全长的重组蛋白。上样蛋白:拟南芥类囊体膜蛋白;1-3泳道上样量分别是0.1 μg, 0.25 μg, 0.5 μg,用15% SDS-Urea-PAGE电泳。
PHY0114A为AtpH抗体,免疫原为拟南芥AtpH (ATCG00140)的多肽序列。上样蛋白:拟南芥类囊体膜蛋白;1-3泳道上样量分别是0.25 μg, 0.5 μg, 1 μg,用Tricine-SDS-PAGE电泳。
蛋白简介参考:
Mustafa Malik Ghulam • Ouafa Zghidi-Abouzid •Emeline Lambert • Silva Lerbs-Mache •(2012) Livia MerendinoTranscriptional organization of the large and the small ATP synthase operons, atpI/H/F/A and atpB/E, in Arabidopsis thaliana chloroplasts. Plant Mol Biol (2012) 79:259–272.



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